Разработка тест-систем для полуколичественного выявления антител у свиней к вирусу гепатита Е в Республике Беларусь


https://doi.org/10.29235/1817-7204-2020-58-3-339-351

Полный текст:


Аннотация

Инфекция вирусного гепатита Е поражает до 80–100 % домашних свиней во всем мире и характеризуется высокой серопревалентностью среди поголовья домашних свиней в странах с умеренным климатом. В Республике Беларусь эпизоотический мониторинг ВГЕ-инфекции является недостаточным ввиду отсутствия необходимого количества доступных и недорогих диагностических ИФА тест-систем с хорошей чувствительностью и специфичностью. В этой связи проведение исследований по разработке отечественной тест-системы для полуколичественного выявления антител к вирусу гепатита Е у свиней с последующей оценкой серопревалентности к ВГЕ в популяции свиней в Республике Беларусь является актуальным. В статье представлены результаты исследований по разработке иммуноферментной тест-системы для полуколичественного определения иммуноглобулинов класса G к ВГЕ в сыворотке крови свиней с использованием рекомбинантных белков, включающих иммунодоминантные аминокислотные последовательности, соответствующие белкам ОRF2 и ОRF3 ВГЕ 3-го генотипа. Определена оптимальная концентрация для сорбции белков ОRF2 и ОRF3 – 2 и 1 мкг/мл соответственно. Диагностическая чувствительность данной тест-системы составляет 94,8 %, а диагностическая специфичность – 100 %. Коэффициенты вариации, являющиеся критерием оценки внутрисерийной и межсерийной воспроизводимости данной тест-системы, составляют 3,5 и 12,4 % соответственно, что позволяет получать воспроизводимые результаты и выявлять специфические антитела к ВГЕ во всех положительных образцах сывороток крови свиней. При исследовании 1235 проб сывороток свиней из разных свиноводческих хозяйств Брестской, Витебской, Гомельской, Гродненской, Минской и Могилевской областей антитела к антигенам вируса гепатита Е (ВГЕ) были обнаружены у 168, или у 13,6 % животных. Описанный метод диагностики может найти широкое применение для науки и практики с целью дальнейшего изучения серопревалентности анти-ВГЕ. Благодарности. Работа выполнена в рамках Межгосударственной программы инновационного сотрудничества государств – участников СНГ на период до 2020 года при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации, идентификатор проекта RFMEFI61316X0061, и Государственного комитета по науке и технологиям Республики Беларусь.


Об авторах

П. А. Красочко
Витебская государственная академия ветеринарной медицины
Беларусь

Красочко Петр Альбинович – доктор ветеринарных наук, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой эпизоотологии и инфекционных болезней животных

ул. 1-я Доватора, 7/11, 210026 Витебск



С. В. Жаворонок
Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси
Беларусь

Жаворонок Сергей Владимирович – доктор медицинских наук, профессор кафедры инфекционных болезней, Белорусский государственный медицинский университет

пр. Дзержинского, 83, 220116 Минск



Д. С. Борисовец
Белорусский государственный медицинский университет
Беларусь

Борисовец Дмитрий Сергеевич – кандидат ветеринарных наук, доцент, заведующий отделом вирусных инфекций, Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси

ул. Брикета, 28, 220003 Минск



П. П. Красочко
Витебская государственная академия ветеринарной медицины
Беларусь

Красочко Павел Петрович – доктор биологических наук, доцент, заведующий отраслевой лабораторией ветеринарной биотехнологии и заразных болезней животных

ул. 1-я Доватора, 7/11, 210026 Витебск



Г. И. Алаторцева
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Россия

Алаторцева Галина Ивановна – кандидат биологических наук, заведующая лабораторией клонирования вирусных геномов отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Малый Казенный переулок, 5а, 105064 Москва



Т. М. Прокопенкова
Белорусский государственный медицинский университет
Беларусь

Прокопенкова Татьяна Михайловна – заведующая виварием Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси

ул. Брикета, 28, 220003 Минск



В. В. Давыдов
Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси
Беларусь

Давыдов Владимир Витольдович – кандидат биологических наук, доцент, заведующий кафедры биологии, Белорусский государственный медицинский университет

пр. Дзержинского, 83, 220116 Минск



Л. А. Анисько
Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси
Беларусь

Анисько Людмила Александровна – кандидат медицинских наук, ассистент кафедры инфекционных болезней, Белорусский государственный медицинский университет

пр. Дзержинского, 83, 220116 Минск



Л. Н. Лухверчик
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Россия

Лухверчик Людмила Николаевна – кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клонирования вирусных геномов отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Малый Казенный переулок, 5а, 105064 Москва



Е. С. Журавлева
Белорусский государственный медицинский университет
Беларусь

Журавлева Екатерина Сергеевна – кандидат ветеринарных наук, заведующая лабораторией вирусных инфекций крупного рогатого скота, Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского, Национальная академия наук Беларуси

ул. Брикета, 28, 220003 Минск



Д. В. Бучукури
Белорусский государственный медицинский университет
Беларусь

Бучукури Джемал Владимирович – кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник отдела вирусных инфекций, Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского

ул. Брикета, 28, 220003 Минск


В. В. Зверев
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Россия

Зверев Виталий Васильевич – академик РАН, доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией молекулярной биотехнологии отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Малый Казенный переулок, 5а, 105064 Москва


Список литературы

1. Transmission of a novel genotype of hepatitis E virus from Bactrian camels to cynomolgus macaques / L. Wang [et al.] // J. of Virology. – 2019. – Vol. 93, N 7. – P. e02014–e02018. https://doi.org/10.1128/jvi.02014-18

2. Molecular virology of hepatitis E virus / R.P. Holla [et al.] // Seminars in Liver Disease. – 2013. – Vol. 33, N 1. – P. 3–14. https://doi.org/10.1055/s-0033-1338110.

3. Hepatitis E virus infection: Epidemiology and treatment implications / G.Y. Lee [et al.] // World J. of Virology. – 2015. – Vol. 4, N 4. – P. 343–355. https://doi.org/10.5501/wjv.v4.i4.343

4. Zoonotic hepatitis E virus: classication, animal reservoirs and transmission routes / V. Doceul [et al.] // Viruses. – 2016. – Vol. 8, N 10. – Art. 270. https://doi.org/10.3390/v8100270

5. Meng, X. J. Recent advances in hepatitis e virus / X.J. Meng // J. of Viral Hepatitis. – 2010. – Vol. 17, N 3. – P. 153–161. https://doi.org/10.1111/j.1365-2893.2009.01257.x

6. Detection of IgM and IgG against hepatitis E virus in serum and meat juice samples from pigs at slaughter in Bavaria, Germany / S. Wacheck [et al.] // Foodborne Pathogens a. Disease. – 2012. – Vol. 9, N 7. – P. 655–660. https://doi.org/10.1089/fpd.2012.1141

7. Murali, A.R. Chronic hepatitis E: A brief review / A.R. Murali, V. Kotwal, S. Chawla // World J. of Hepatology. – 2015. – Vol. 7, N 19. – P. 2194–2201. https://doi.org/10.4254/wjh.v7.i19.2194

8. Genome sequence of a hepatitis e virus of genotype 3e from a chronically infected kidney transplant recipient / V. Moal [et al.] // Genome Announcements. – 2014. – Vol. 2, N 1. – P. e01156-13. https://doi.org/10.1128/genomea.01156-13

9. Hepatitis e virus of subtype 3i in chronically infected kidney transplant recipients in southeastern France / V. Moal [et al.] // J. of Clinical Microbiology. – 2014. – Vol. 52, N 11. – P. 3967–3972. https://doi.org/10.1128/jcm.02028-14

10. Hepatitis E: An old infection with new implications / G. Marano [et al.] // Blood Transfusion. – 2015. – Vol. 13, N 1. – P. 6–20. https://doi.org/10.2450/2014.0063-14

11. A novel virus in swine is closely related to the human hepatitis E virus / X.J. Meng [et al.] // Proc. of the Nat. Acad. of Sciences of the USA. – 1997. – Vol. 94, N 18. – P. 9860–9865. https://doi.org/10.1073/pnas.94.18.9860

12. Обнаружение вируса гепатита Е среди кроликов в Республике Беларусь / А.А. Арабей [и др.] // Воен. медицина. – 2015. – №2. – С. 51–53.

13. Van der Poel, W.H. Food and environmental routes of Hepatitis E virus transmission / W.H. Van der Poel // Current Opinion in Virology. – 2014. – Vol. 4. – P. 91–96. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2014.01.006

14. Molecular investigation on the presence of hepatitis E virus (HEV) in wild game in North-Western Italy / L. Serracca [et al.] // Food a. Environmental Virology. – 2015. – Vol. 7, N 3. – P. 206–212. https://doi.org/10.1007/s12560-015-9201-9

15. Sporadic acute hepatitis E in Hokkaido, Japan, may be food-borne, as suggested by the presence of hepatitis E virus in pig liver as food / Y. Yazaki [et al.] // J. of Gen. Virology. – 2003. – Vol. 84, N 9. – P. 2351–2357. https://doi.org/10.1099/vir.0.19242-0

16. Zoonotic transmission of hepatitis E virus from deer to human beings / S. Tei [et al.] // Lancet. – 2003. – Vol. 362, N 9381. – P. 371–373. https://doi.org/10.1016/s0140-6736(03)14025-1

17. Hepatitis E virus transmission from wild boar meat / T.-C. Li [et al.] // Emerging Infectious Diseases. – 2005. – Vol. 11, N 12. – P. 1958–1960. https://doi.org/10.3201/eid1112.051041

18. Renou, C. Foodborne transmission of hepatitis E virus from raw pork liver sausage, France / C. Renou, A. M.R. Afonso, N. Pavio // Emerging Infectious Diseases. – 2014. – Vol. 20, N 11. – P. 1945–1947. https://doi.org/10.3201/eid2011.140791

19. Riveiro-Barciela, M. Hepatitis E virus: new faces of an old infection / M. Riveiro-Barciela, F. Rodríguez-Frías, M. Buti // Annals of Hepatology. – 2012. – Vol. 12, N 6. – P. 861–870. https://doi.org/10.1016/s1665-2681(19)31290-6

20. Филогенетический анализ последовательностей ВГЕ, выявленных в Республике Беларусь / А.А. Арабей [и др.] // Международная научно-практическая конференция «Молекулярная диагностика 2018», Минск, 27–28 сентября 2018 г. : сб. тр. / М-во здравоохранения Респ. Беларусь [и др.] ; под ред. В.И. Покровского. – Минск, 2018. – С. 288–290.

21. Sridhar, S. Hepatitis E: a disease of reemerging importance / S. Sridhar, S.K. P. Lau, P.C. Y. Woo // J. of the Formosan Med. Assoc. – 2015. – Vol. 114, N 8. – P. 681–690. https://doi.org/10.1016/j.jfma.2015.02.003

22. Distribution of hepatitis E virus infection and its prevalence in pigs on commercial farms in Spain / C. Seminati [et al.] // Veterinary J. – 2008. – Vol. 175, N 1. – P. 130–132. https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2006.11.018

23. Detection of hepatitis E virus shedding in feces of pigs at different stages of production using reverse transcriptionpolymerase chain reaction / S. Fernández-Barredo [et al.] // J. of Veterinary Diagnostic Investigation. – 2006. – Vol. 18, N 5. – P. 462–465. https://doi.org/10.1177/104063870601800506

24. Hepatitis E virus is highly prevalent in the Danish pig population / S.Ø. Breum [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2010. – Vol. 146, N 1–2. – P. 144–149. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2010.05.002

25. Longitudinal study of hepatitis E virus infection in Spanish farrow-to-nish swine herds / M. Casas [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2011. – Vol. 148, N 1. – P. 27–34. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2010.08.010

26. Prevalence and genetic characterization of hepatitis E virus in paired samples of feces and serum from naturally infected pigs / S. Fernández-Barredo [et al.] // Canad. J. of Veterinary Research. – 2007. – Vol. 71, N 3. – P. 236–240.

27. Detection and molecular characterization of zoonotic viruses in swine fecal samples in Italian pig herds / M. Monini [et al.] // Arch. of Virology. – 2015. – Vol. 160, N 10. – P. 2547–2556. https://doi.org/10.1007/s00705-015-2538-4

28. Experimental infection of pregnant gilts with swine hepatitis E virus / C. Kasorndorkbua [et al.] // Canad. J. of Veterinary Research. – 2003. – Vol. 67, N 4. – P. 303–306.

29. Retrospective serological study on hepatitis E infection in pigs from 1985 to 1997 in Spain / M. Casas [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2009. – Vol. 135, N 3–4. – P. 248–252. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2008.09.075

30. Serological and molecular investigation of swine hepatitis E virus in pigs raised in southern Italy / N. Costanzo [et al.] // J. of Food Protection. – 2015. – Vol. 78, N 11. – P. 2099–2102. https://doi.org/10.4315/0362-028x.jfp-15-159

31. Viral and antibody HEV prevalence in swine at slaughterhouse in Italy / I. Di Bartolo [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2011. – Vol. 149, N 3–4. – P. 330–338. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2010.12.007

32. Assessment of domestic pigs, wild boars and feral hybrid pigs as reservoirs of hepatitis E virus in Corsica, France / F. Jori [et al.] // Viruses. – 2016. – Vol. 8, N 8. – Art. 236. https://doi.org/10.3390/v8080236

33. Prevalence of hepatitis E virus in slaughter-age pigs in Scotland / C. Crossan [et al.] // Epidemiology a. Infection. – 2015. – Vol. 143, N 10. – P. 2237–2240. https://doi.org/10.1017/s0950268814003100

34. Prevalence of hepatitis E virus infection in pigs at the time of slaughter, United Kingdom, 2013 / S. Grierson [et al.] // Emerging Infectious Diseases. – 2015. – Vol. 21, N 8. – P. 1396–1401. https://doi.org/10.3201/eid2108.141995

35. Hepatitis E virus in domestic pigs, wild boars, pig farm workers, and hunters in Estonia / A. Ivanova [et al.] // Food a. Environmental Virology. – 2015. – Vol. 7, N 4. – P. 403–412. https://doi.org/10.1007/s12560-015-9210-8

36. Hepatitis E virus seroprevalence of domestic pigs in Germany determined by a novel in-house and two reference ELISAs / P. Dremsek [et al.] // J. of Virological Methods. – 2013. – Vol. 190, N 1–2. – P. 11–16. https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2013.03.010

37. Seroprevalence of hepatitis E virus (HEV) in humans living in high pig density areas of Germany / A. Krumbholz [et al.] // Med. Microbiology a. Immunology. – 2014. – Vol. 203, N 4. – P. 273–282. https://doi.org/10.1007/s00430-014-0336-3

38. Widespread distribution of hepatitis e virus in Spanish pig herds / N. Jimenez De Oya [et al.] // BMC Research Notes. – 2011. – Vol. 4, N 1. – Art. 412. https://doi.org/10.1186/1756-0500-4-412

39. Prevalence of Hepatitis E virus-specific antibodies in sera of German domestic pigs estimated by using direct assays / C. Baechlein [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2010. – Vol. 144, N 1–2. – P. 187–191. https://doi.org/10.1016/j. vetmic.2009.12.011

40. Получение рекомбинантного аналога капсидного белка вируса гепатита Е 1 генотипа: клонирование, экспрессия, очистка, оценка антигенных свойств / Г.И. Алаторцева [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2017. – №6. – C. 72–80. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-6-72-80

41. Получение рекомбинантного белка ORF3 вируса гепатита Е 1 генотипа с применением метода оптимизации кодонов / Г.И. Алаторцева [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2017. – №6. – C. 63– 72. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-6-63-72

42. Получение рекомбинантного белка ORF3 вируса гепатита Е 3 генотипа и оценка его антигенных свойств / Г.И. Алаторцева [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2018. – №5. – C. 46–53. https:// doi.org/10.36233/0372-9311-2018-5-46-53

43. Разработка рекомбинантного белка капсида вируса гепатита Е 3 генотипа: клонирование, экспрессия, очистка, оценка антигенных свойств / Г.И. Алаторцева [и др.] // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2019. – №1. – C. 10–17. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-1-10-17


Дополнительные файлы

Просмотров: 92

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1817-7204 (Print)
ISSN 1817-7239 (Online)