vestiagИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия аграрных наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus. Agrarian Series1817-72041817-7239The Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"10.29235/1817-7204-2025-63-1-45-57vestiag-785Research ArticleЖЫВЁЛАГАДОЎЛЯ І ВЕТЭРЫНАРНАЯ МЕДЫЦЫНАANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY MEDICINEТрансгенные кролики с генами гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека и зеленого флуоресцирующего белкаTransgenic rabbits with genes of human granulocyte colony-stimulating factor and green fluorescent proteinКолосковаЕ. М.KoloskovaE. M.

Колоскова Елена Михайловна – кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории пищеварения и межуточного обмена

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Elena M. Koloskova – Ph. D. (Biology), Senior Re searcher at the Laboratory of Digestion

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

heleko3@yandex.ruЕзерскийВ. А.EzerskijV. A.

Езерский Вадим Аркадьевич – младший научный сотрудник лаборатории микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Vadim A. Ezerskij – Junior Researcher at the Laboratory of Microbiology and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

ez.vadim@yandex.ruТрубицинаТ. П.TrubitsinaT. P.

Трубицина Татьяна Петровна – кандидат биологических наук, специалист лаборатории микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Tatjana P. Trubitsina – Ph. D. (Biology), Specialist at the Laboratory of Microbiology and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

trubitsina.tp@yandex.ruЖуковаО. Б.ZhukovaO. B.

Жукова Ольга Борисовна – научный сотрудник лаборатории микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Olga B. Zhukova – Researcher at the Laboratory of Microbiology and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

olgazhukova19801031@gmail.comОстренкоК. С.OstrenkoK. S.

Остренко Константин Сергеевич – доктор биологических наук, заведующий          лабораторией микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Konstantin S. Ostrenko – Dr. Sc. (Biology), Head of the Laboratory of Microbiology and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

ostrenkoks@gmail.comБеловаН. В.BelovaN. V.

Белова Надежда Викторовна – кандидат биологических наук, научный сотрудник              лаборатории микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Nadezhda V. Belova – Ph. D. (Biology), Researcher at the Laboratory of Microbiology  and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

navikbel@mail.ruКутьинИ. И.KutijnI. V.

Кутьин Иван Владимирович – научный сотрудник лаборатории микробиологии и иммунобиотехнологии

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Ivan V. Kutijn – Researcher at the Laboratory of Microbiology and Immunobiotechnology

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

kurookami@mail.ruРябыхВ. П.RyabykhV. P.

Рябых Владимир Павлович – доктор биологических наук, профессор

290013, п. Институт, Боровск, Калужская обл.

Vladimir P. Ryabykh – Dr. Sc. (Biology), Professor

249013, v. Institut, Borovsk, Kaluga Region

Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных – филиал ФИЦ животноводства – ВИЖ имени академика Л. К. ЭрнстаAll-Russian Research Institute of Physiology, Biochemistry and Animal Nutrition (VNIIFBiP) – Branch of the Federal Research Center for Animal Husbandry named after Academy Member L. K. Ernst2025280120256314557Copyright © Колоскова Е.М., Езерский В.А., Трубицина Т.П., Жукова О.Б., Остренко К.С., Белова Н.В., Кутьин И.И., Рябых В.П., 20252025Колоскова Е.М., Езерский В.А., Трубицина Т.П., Жукова О.Б., Остренко К.С., Белова Н.В., Кутьин И.И., Рябых В.П.Koloskova E.M., Ezerskij V.A., Trubitsina T.P., Zhukova O.B., Ostrenko K.S., Belova N.V., Kutijn I.V., Ryabykh V.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestiagr.belnauka.by/jour/article/view/785

Гранулоцит-колониестимулирующий фактор человека (GCSF, ГКСФ) – один из белков фармакологического назначения, который может быть выделен из молока трансгенных (ТГ) животных. Была получена плазмида, содержащая ген GCSF человека под контролем регуляторных элементов гена β-лактоглобулина крупного рогатого скота, и ген репортерного зеленого флуоресцентного белка (ЕGFP) под цитомегаловирусным (cmv) промотором. Использование выбранных промоторов обеспечивает тканеспецифичную экспрессию целевого белка в молочной железе ТГ животного-продуцента и высокий уровень ранней экспрессии репортерного белка в клетках эукариот, что позволяет детектировать ТГ эмбрионы на стадии культивирования и производить их предымплантационный отбор. Тестирование конструкции для оценки ее эффективности проводили на ТГ кроликах, полученных методом микроинъекции в мужской пронуклеус зигот. Был сделан вывод о токсичности GFP для эмбрионов на ранних стадиях развития из-за чрезмерной экспрессии гена EGFP под сильным cmv промотором. Была получена ТГ крольчиха (F0), у которой методом ИФА был оценен уровень ГКСФ человека в молоке и сыворотке крови. Из 22 крольчат, полученных от нее за четыре окрола, два были трансгенны. От ТГ самца F0 было получено потомство (F1), 56 % которого составляли самцы, из них 88 % были ТГ и по состоянию здоровья не отличались от обычных кроликов. Среди самок ТГ было 10 %, и они погибали в течение двух недель после рождения.

Human granulocyte–colony stimulating factor (GCSF) is one of the pharmacological proteins that can be isolated from the milk of transgenic (TG) animals. The plasmid containing the human GCSF gene under the control of regulatory elements of the bovine β-lactoglobulin gene and the reporter green fluorescent protein (EGFP) gene under the cytomegalovirus (cmv) promoter were obtained. The use of the selected promoters ensures tissue-specific expression of the target protein in the mammary gland of the TG producing animal and a high level of early expression of the reporter protein in eukaryotic cells, which makes it possible to detect TG embryos at the cultivation stage and perform their preimplantation selection. Testing of the gene construct effectiveness was carried out on TG rabbits obtained by microinjection into the male pronucleus of zygotes. It was concluded that GFP is toxic to embryos in the early stages of development due to overexpression of the EGFP gene under a strong cmv promoter. The TG female rabbit (F0) was obtained, in which the level of human GKSF in milk and blood serum was assessed by the ELISA method. Of the 22 baby rabbits obtained from her in four kindling, two were transgenic. Offspring (F1) was obtained from the TG male F0, 56 % of which were males, of which 88 % were TG and did not differ from ordinary rabbits in terms of health. Among females, TG was 10 %, and they died within two weeks after birth.

трансгенные кроликимикроинъекцииэмбрионгенная конструкцияGCSFЕGFPtransgenic rabbitsmicroinjectionsembryogenetic constructGCSFEGFPReferencesKues, W. A. Advances in farm animal transgenesis / W. A. Kues, H. Niemann // Preventive Veterinary Medicine. – 2011. – Vol. 102, № 2. – P. 146–156. https://doi.org/10.1016/j.prevetmed.2011.04.009Kues W. A., Niemann H. Advances in farm animal transgenesis. Preventive Veterinary Medicine, 2011, vol. 102, no. 2, pp. 146–156. https://doi.org/10.1016/j.prevetmed.2011.04.009The transgenic animal platform for biopharmaceutical production / L. R. Bertolini, H. Meade, C. R. Lazzarotto [et al.] // Transgenic Research. – 2016. – Vol. 25, № 3. – P. 329–343. https://doi.org/10.1007/s11248-016-9933-9Bertolini L. R., Meade H., Lazzarotto C. R., Martins L. T., Tavares K. C., Bertolini M., Murray J. D. The transgenic animal platform for biopharmaceutical production. Transgenic Research, 2016, vol. 25, no. 3, pp. 329–343. https://doi.org/10.1007/s11248-016-9933-9Transgenic rabbits for the production of biologically-active recombinant proteins in the milk / F. O. Castro, J. Limonta, A. Rodrıguez [et al.] // ́ Genetic Analysis: Biomolecular Engineering. – 1999. – Vol. 15, № 3–5. – P. 179–187. https://doi.org/10.1016/s1050-3862(99)00024-8Castro F. O., Limonta J., Rodriguez A., Aguirre A., de la Fuente J., Aguilar A., Ramos B., Hayes O. Transgenic rabbits for the production of biologically-active recombinant proteins in the milk. Genetic Analysis: Biomolecular Engineering, 1999, vol. 15, no. 3–5, pp. 179–187. https://doi.org/10.1016/s1050-3862(99)00024-8Трансгенные и нокаутные кролики в биомедицине и генотерапии. CRISPR/Cas9-технологии (обзор) / Е. М. Колоскова, В. Н. Каркищенко, В. А. Езерский [и др.] // Биомедицина. – 2019. – Т. 15, № 4. – P. 12–33. https://doi.org/10.33647/2074-5982-15-4-12-33Koloskova E. M., Karkischenko V. N., Yezersky V. A., Petrova N. V., Maksimenko S. V., Matveyenko E. L. Rabbit biomodels of human diseases developed using new genomic technologies. CRISPR/Cas9 (review). Biomeditsina = Journal Biomed, 2019, vol. 15, no. 4, pp. 12–33 (in Russian). https://doi.org/10.33647/2074-5982-15-4-12-33Mechanisms of hemostimulating effects of granulocytic CSF and pantohematogen under conditions of cytostatic myelosuppression / L. A. Miroshnichenko, V. V. Shdanov, G. N. Zyuz’kov [et al.] // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. – 2011. – Vol. 150, № 6. – P. 702–706. https://doi.org/10.1007/s10517-011-1228-9Miroshnichenko L. A., Shdanov V. V., Zyuz’kov G. N., Simanina E. V., Stavrova L. A., Udut E. V., Khrichkova T. Y., Minakova M. Y., Goldberg V. E., Dygai A. M. Mechanisms of hemostimulating effects of granulocytic CSF and pantohematogen under conditions of cytostatic myelosuppression. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2011, vol. 150, no. 6, pp. 702–706. https://doi.org/10.1007/s10517-011-1228-9Possibilities of using granulocyte colony-stimulating factor in reproductive medicine. A literature review / C. T. Nguyen, D. A. Niauri, N. I. Tapilskaya, A. М. Gzgzyan // Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. – 2021. – Vol. 70, № 2. – P. 119–128. https://doi.org/10.17816/JOWD43587Nguyen C., Niauri D. A., Tapilskaya N. I., Gzgzyan A. M. Possibilities of using granulocyte colony-stimulating factor in reproductive medicine. A literature review. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases, 2021, vol. 70, no. 2, pp. 119–128. https://doi.org/10.17816/JOWD43587Metcalf, D. Biochemistry of the colony-stimulating factors / D. Metcalf, N. A. Nicola // The hematopoietic colonystimulating factors. From biology to clinical applications / D. Metcalf, N. A. Nicola. – Cambridge [etc.], 1995. – P. 44–64. https://doi.org/10.1017/cbo9780511663376.005Metcalf D., Nicola N. A. Biochemistry of the colony-stimulating factors. The hematopoietic colony-stimulating factors. From biology to clinical applications. Cambridge [etc.], 1995, pp. 44–64. https://doi.org/10.1017/cbo9780511663376.005Скрыпник, К. А. Человеческий гранулоцитарный колониестимулирующий фактор в клинической практике / К. А. Скрыпник, В. С. Косоруков // Российский биотерапевтический журнал. – 2011. – T. 10, № 2. – С. 19–24.Skrypnik K. A., Kosorukov V. S. Human granulocyte-colony stimulating factor as a new therapeutic agent in clinic. Rossiiskii bioterapevticheskii zhurnal = Russian Journal of Biotherapy, 2011, vol. 10, no. 2, pp. 19–24 (in Russian).Биоаналоговые (биоподобные) лекарственные препараты рекомбинантного гранулоцитарного-колониести мули рующего фактора. Оценка качества / Ж. И. Авдеева, А. А. Солдатов, Н. А. Алпатова [и др.] // Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. – 2015. – № 1 (53). – С. 4–14.Avdeeva Zh. I., Soldatov A. A., Alpatova N. A., Kiselevsky M. V., Lysikova S. L., Bondarev V. P., Medunitsyn N. V., Mosyagin V. D., Merkulov V. A., Mironov A. N. Recombinant granulocyte colony stimulating factor biosimilars. Quality assessment. Biopreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment, 2015, no. 1 (53), pp. 4–14 (in Russian).Production of biologically active human granulocyte colony stimulating factor in the milk of transgenic goat / J. H. Ko, Ch.-S. Lee, K. H. Kim [et al.] // Transgenic Research. – 2000. – Vol. 9, № 3. – P. 215–222. https://doi.org/10.1023/a:1008972010351Ko J. H., Lee C. S., Kim K. H., Pang M. G., Koo J. S., Fang N., Koo D. B., Oh K. B., Youn W. S., Zheng G. D., Park J. S., Kim S. J., Han Y. M., Choi I. Y., Lim J., Shin S. T., Jin S. W., Lee K. K., Yoo O. J. Production of biologically active human granulocyte colony stimulating factor in the milk of transgenic goat. Transgenic Research, 2000, vol. 9, no. 3, pp. 215–222. https://doi.org/10.1023/a:1008972010351Секреция биологически активного гранулоцит колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) человека в молоке трансгенных мышей / Г. А. Дворянчиков, И. А. Серова, Л. Е. Андреева [и др.] // Генетика. – 2005. – Т. 41, № 10. – С. 1330–1337.Dvoryanchikov G. A., Serova I. A., Dias L. P. B., Serov O. L., Andreeva L. E., Azevedo S. Secretion of biologically active human granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) in milk of transgenic mice. Russian Journal of Genetics, 2005, vol. 41, no. 10, pp. 1088–1094. https://doi.org/10.1007/s11177-005-0204-8A 3,387 bp 5′-flanking sequence of the goat alpha-S1-casein gene provides correct tissue-specific expression of human granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF) in the mammary gland of transgenic mice / I. A. Serova, G. A. Dvoryanchikov, L. E. Andreeva [et al.] // Transgenic Research. – 2012. – Vol. 21, № 3. – P. 485–498. https://doi.org/10.1007/s11248-011-9547-1Serova I. A., Dvoryanchikov G. A., Andreeva L. E., Burkov I. A., Dias L. P., Battulin N. R., Smirnov A. V., Serov O. L. A 3,387 bp 5′-flanking sequence of the goat alpha-S1-casein gene provides correct tissue-specific expression of human granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF) in the mammary gland of transgenic mice. Transgenic Research, 2012, vol. 21, no. 3, pp. 485–498. https://doi.org/10.1007/s11248-011-9547-1The establishment of two transgenic goat lines for mammary gland hG-CSF expression / V. J. F. Freitas, I. A. Serova, R. R. Moura [et al.] // Small Ruminant Research. – 2012. – Vol. 105, № 1–3. – P. 105–113. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2012.03.009Freitas V. J. F., Serova I. A., Moura R. R., Andreeva L. E., Melo L. M., Teixeira D. I. A., Pereira A. F., Lopes-Jrd E. S., Diase L. P. B., Nunes-Pinheirof D. C. S., Sousa F. C., Alcantara-Neto A. S., Albuquerque E. S., Melo C. H. S., Rodrigues V. H. V., Batista R. I. T., Dvoryanchikov G. A., Serov O. L. The establishment of two transgenic goat lines for mammary gland hG-CSF expression. Small Ruminant Research, 2012, vol. 105, pp. 105–113. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2012.03.009Bovine alpha s1-casein gene sequences direct highlevel expression of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in the milk of transgenic mice / M. Uusi-Oukari, J.-M. Hyttinen, V.-P. Korhonen [et al.] // Transgenic Research. – 1997. – Vol. 6, № 1. – P. 75–84. https://doi.org/10.1023/a:1018461201385Uusi-Oukari M., Hyttinen J. M., Korhonen V. P., Västi A., Alhonen L., Jänne O. A., Jänne J. Bovine alpha s1-casein gene sequences direct high level expression of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in the milk of transgenic mice. Transgenic Research, 1997, vol. 6, no. 1, pp. 75–84. https://doi.org/10.1023/a:1018461201385Expression of the human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) gene under control of the 5′-regulatory sequence of the goat alpha-S1-casein gene with and without a MAR element in transgenic mice / I. A. Burkov, I. A. Serova, N. R. Battulin [et al.] // Transgenic Research. – 2013. – Vol. 22, № 5. – P. 949–964. https://doi.org/10.1007/s11248-013-9697-4Burkov I. A., Serova I. A., Battulin N. R., Smirnov A.V., Babkin I. V., Andreeva L. E., Dvoryanchikov G. A., Serov O. L. Expression of the human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) gene under control of the 5′-regulatory sequence of the goat alpha-S1-casein gene with and without a MAR element in transgenic mice. Transgenic Research, 2013, vol. 22, no. 5, pp. 949–964. https://doi.org/10.1007/s11248-013-9697-4Самойлов, А. В. Получение трансгенных кур с геном гранулоцитарного колониестимулирующего фактора человека методом опосредованного генного переноса с помощью сперматозоидов / А. В. Самойлов, А. З. Кесян, Н. М. Сураева // Известия Российской академии наук. Серия биологическая. – 2013. – № 5. – С. 517–521. https://doi.org/10.7868/S0002332913040140Samoylov A. V., Kesyan A. Z., Suraeva N. M. Development of transgenic chicken with a gene of human granulocyte colony-stimulating factor using sperm-mediated gene transfer. Biology Bulletin, 2013, vol. 40, no. 5, pp. 419–422. https://doi.org/10.1134/s1062359013040134Noninvasive fluorescent screening of microinjected bovine embryos to predict transgene integration / S. J. Rosochacki, L. Kozikova, M. Korwin-Kossakowski [et al.] // Folia Biologica. – Krakow, 2003. – Vol. 51, № 1–2. – P. 97–104.Rosochacki S. J., Kozikova L. V., Korwin-Kossakowski M., Matejczyk M., Połoszynowicz J., Duszewska A. M. Noninvasive fluorescent screening of microinjected bovine embryos to predict transgene integration. Folia Biologica (Krakow), 2003, vol. 5, no. 1–2, pp. 97–104.Efficient selection of transgenic mouse embryos using EGFP as a marker gene / M. Kato, K. Yamanouchi, M. Ikawa [et al.] // Molecular Reproduction and Development. – 1999. – Vol. 54, № 1. – P. 43–48. https://doi.org/10.1002/(sici)10982795(199909)54:1<43::aid-mrd6>3.0.co;2-nKato M., Yamanouchi K., Ikawa M., Okabe M. Efficient selection of transgenic mouse embryos using EGFP as a marker gene. Molecular Reproduction and Development, 1999, vol. 54, no. 1, pp. 43–48. https://doi.org/10.1002/(sici)10982795(199909)54:1<43::aid-mrd6>3.0.co;2-nZimmer, M. GFP: from jellyfish to the Nobel prize and beyond / M. Zimmer // Chemical Society Reviews. – 2009. – Vol. 38, № 10. – P. 2823–2832. https://doi.org/10.1039/b904023dZimmer M. GFP: from jellyfish to the Nobel prize and beyond. Chemical Society Reviews, 2009, vol. 38, no. 10, pp. 2823–2832. https://doi.org/10.1039/b904023dNew Wistar Kyoto and spontaneously hypertensive rat transgenic models with ubiquitous expression of green fluorescent protein / A. I. Garcia-Diaz, B. Moyon, P. M. Coan [et al.] // Disease Models & Mechanisms. – 2016. – Vol. 9, № 4. – P. 463–471. https://doi.org/10.1242/dmm.024208Garcia-Diaz A. I., Moyon B., Coan P. M., Alfazema N., Venda L., Woollard K., Aitman T. New Wistar Kyoto and spontaneously hypertensive rat transgenic models with ubiquitous expression of green fluorescent protein. Disease Models & Mechanisms, 2016, vol. 9, no. 4, pp. 463–471. https://doi.org/10.1242/dmm.024208Effect of hormone modulations on donorderived spermatogenesis or colonization after syngeneic and xenotransplantation in mice / G. Shetty, Z. Wu, T. N. A. Lam [et al.] // Andrology. – 2019. – Vol. 7, № 2. – P. 257–265. https://doi.org/10.1111/andr.12571Shetty G., Wu Z., Lam T. N. A., Phan T. T., Orwig K. E., Meistrich M. L. Effect of hormone modulations on donorderived spermatogenesis or colonization after syngeneic and xenotransplantation in mice. Andrology, 2019, vol. 7, no. 2, pp. 257–265. https://doi.org/10.1111/andr.12571Early tissue formation on whole-area osteochondral defect of rabbit patella by covering with fibroin sponge / E. Hirakata, N. Tomita, Y. Tamada [et al.] // Journal of Biomedical Materials Research. Part B: Applied Biomaterials. – 2016. – Vol. 104, № 7. – P. 1474–1482. https://doi.org/10.1002/jbm.b.33656Hirakata E., Tomita N., Tamada Y., Suguro T., Nakajima M., Kambe Y., Yamada K., Yamamoto K., Kawakami M., Otaka A., Okumura H., Suzuki S. Early tissue formation on whole-area osteochondral defect of rabbit patella by covering with fibroin sponge. Journal of Biomedical Materials Research. Part B: Applied Biomaterials, 2016, vol. 104, no. 7, pp. 1474– 1482. https://doi.org/10.1002/jbm.b.33656Transposon-mediated transgenesis, transgenic rescue, and tissue-specific gene expression in rodents and rabbits / K. Katter, A. M. Geurts, O. Hoffmann [et al.] // The FASEB Journal. – 2013. – Vol. 27, № 3. – P. 930–941. https://doi.org/10.1096/fj.12-205526Katter K., Geurts A. M., Hoffmann O., Mates L., Landa V., Hiripi L. [et al.]. Transposon-mediated transgenesis, transgenic rescue, an tissue-specific gene expression in rodents and rabbits. The FASEB Journal, 2013, vol. 27, no. 3, pp. 930–941. https://doi.org/10.1096/fj.12-205526Establishment and characterization of CAG/EGFP transgenic rabbit line / R. Takahashi, T. Kuramochi, K. Aoyagi [et al.] // Transgenic Research. – 2007. – Vol. 16, № 1. – P. 115–120. https://doi.org/10.1007/s11248-006-9043-1Takahashi R., Kuramochi T., Aoyagi K., Hashimoto S., Miyoshi I., Kasai N., Hakamata Y., Kobayashi E., Ueda M. Establishment and characterization of CAG/EGFP transgenic rabbit line. Transgenic Research, 2007, vol. 16, no. 1, pp. 115– 120. https://doi.org/10.1007/s11248-006-9043-1Murakami, T. GFP-transgenic animals for in vivo imaging: rats, rabbits, and pigs / T. Murakami, S. Kobayashi // In vivo cellular imaging using fluorescent proteins: methods and protocols / ed. R. M. Hoffman. – New York, 2012. – P. 177–189. – (Methods in Molecular Biology; vol. 872). https://doi.org/10.1007/978-1-61779-797-2_12Murakami T., Kobayashi S. GFP-transgenic animals for in vivo imaging: rats, rabbits, and pigs. In vivo cellular imaging using fluorescent proteins: methods and protocols. Methods in Molecular Biology. Vol. 872. New York, 2012, pp. 177–189. https://doi.org/10.1007/978-1-61779-797-2_12Езерский, В. А. Создание генно-инженерной конструкции, содержащей структурный ген GCSF человека под контролем регуляторных элементов гена β-лактоглобулина крупного рогатого скота / В. А. Езерский, Л. Б. Иванова, В. Г. Шевченко // Проблемы биологии продуктивных животных. – 2007. – № 1. – C. 123–131.Ezerskii V. A., Ivanova L. B., Shevchenko V. G. Gene-engineering construction containing human gene G-CSF under control of regulatory elements of bovine gene β-lactoglobulin. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh = Problems of Productive Animal Biology, 2007, no. 1, pp. 123–131 (in Russian).Генетическая конструкция, включающая кодирующую последовательность Г-КСФ человека с регуляторными областями гена β-лактоглобулина КРС и репортерный ген EGFP / В. А. Езерский, Е. М. Колоскова, Т. П. Трубицина [и др.] // Проблемы биологии продуктивных животных. – 2018. – № 3. – С. 35–44. https://doi.org/10.25687/1996-6733.prodanimbiol.2018.3.35-44Ezerskii V. A., Koloskova E. M., Trubitsina T. P., Maksimenko S. V., Ryabykh V. P. Genetic engineering structure comprising a coding sequence of human G-CSF with the regulatory regions of bovine β-lactoglobulin gene and reporter gene EGFP. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh = Problems of Productive Animal Biology, 2018, no. 3, pp. 35–44 (in Russian). https://doi.org/10.25687/1996-6733.prodanimbiol.2018.3.35-44Chrenek, P. Quality of transgenic rabbit embryos with different EGFP gene constructs / P. Chrenek, M. Bauer, A. V. Makarevich // Zygote. – 2011. – Vol. 19, № 1. – P. 85–90. https://doi.org/10.1017/S0967199410000109Chrenek P., Bauer M., Makarevich A.V. Quality of transgenic rabbit embryos with different EGFP gene constructs. Zygote, 2011, vol. 19, no. 1, pp. 85–90. https://doi.org/10.1017/S0967199410000109A very strong enhancer is located upstream of an immediate early gene of human cytomegalovirus / M. Boshart, F. Weber, G. Jahn [et al.] // Cell. – 1985. – Vol. 41, № 2. – P. 521–530. https://doi.org/10.1016/s0092-8674(85)80025-8Boshart M., Weber F., Jahn G., Dorsch-Häsler K., Fleckenstein B., Schaffner W. A very strong enhancer is located upstream of an immediate early gene of human cytomegalovirus. Cell, 1985, vol. 41, no. 2, pp. 521–530. https://doi.org/10.1016/s0092-8674(85)80025-8Birch, J. R. Antibody production / J. R. Birch, A. J. Racher // Advanced Drug Delivery Reviews. – 2006. – Vol. 58, № 5–6. – P. 671–685. https://doi.org/10.1016/j.addr.2005.12.006Birch J. R., Racher A. J. Antibody production. Advanced Drug Delivery Reviews, 2006, vol. 58, no. 5–6, pp. 671–685. https://doi.org/10.1016/j.addr.2005.12.006Khan, K. H. Gene expression in Mammalian cells and its applications / K. H. Khan // Advanced Pharmaceutical Bulletin. – 2013. – Vol. 3, № 2. – P. 257–263. https://doi.org/10.5681/apb.2013.042Khan K. H. Gene expression in Mammalian cells and its applications. Advanced Pharmaceutical Bulletin, 2013, vol. 3, no. 2, pp. 257–263. https://doi.org/10.5681/apb.2013.042Lipták, N. GFP transgenic animals in biomedical research: a review of potential disadvantages / N. Lipták, Z. Bősze, L. Hiripi // Physiological Research. – 2019. – Vol. 68, № 4. – P. 525–530. https://doi.org/10.33549/physiolres.934227Lipták N., Bősze Z., Hiripi L. GFP transgenic animals in biomedical research: a review of potential disadvantages. Physiological Research, 2019, vol. 68, no. 4, pp. 525–530. https://doi.org/10.33549/physiolres.934227Серов, О. Л. Трансгенные животные: фундаментальные и прикладные аспекты / О. Л. Серов // Вавиловский журнал генетики и селекции. – 2013. – Т. 17, № 4/2. – С. 1055–1064.Serov O. L. Transgenic animals: basic and applied aspects. Vavilovskii zhurnal genetiki i selektsii = Vavilov Journal of Genetics and Breeding, 2013, vol. 17, no. 4/2, pp. 1055–1064 (in Russian).Эффективность интеграции гена лактоферрина человека в геном мыши и кролика / С. И. Тевкин, М. С. Шишиморова, В. А. Езерский [и др.] // Сельскохозяйственная биология. – 2009. – Т. 44, № 2. – C. 55–61.Tevkin S. I., Shishimorova M. S., Ezerskii V. А., Trubitsina T. P., Fatkulina О. B., Ryabykh V. P. Integration effeciency of the human lactoferrin gene in the mouse and rabbit genom. Sel’skokhozyaistvennaya biologiya = Agricultural Biology, 2009, vol. 44, no. 2, pp. 55–61 (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.